• <tr id="z7kg3"></tr>
  • <track id="z7kg3"><ruby id="z7kg3"><tt id="z7kg3"></tt></ruby></track>
      1. <tr id="z7kg3"><label id="z7kg3"></label></tr><p id="z7kg3"><strong id="z7kg3"><small id="z7kg3"></small></strong></p>
        1.  

          深圳市安必勝  

          首頁 | 企業郵箱 | 設為首頁 | 加入收藏

           

          首  頁 公司簡介 MOBIO試劑盒 儀器設備 技術文章 MOBIO參考文獻 產品答疑 聯系方式
            產品搜索
          互聯網 安必勝
            技術文章
          聯系方式
          訂購電話: 0755-8348 9872
          傳 真: 0755-8348 9700
          訂貨郵箱:: anbiosci@126.com
          技術支持QQ: 2306499490
          客服QQ1: 854520684
          客服QQ2: 1362545403
          客服QQ3: 2759064681
            你所在的位置:技術文章 > 如何在酶解DNA時保護好你的RNA

          如何在酶解DNA時保護好你的RNA

          作者:Michelle Tetreault Carlson 來源:美國MoBio實驗室【字號:

          核酸提取過程中DNA酶解步驟是引起RNA降解或丟失的最常見原因之一。酶解反應一般在硅膠離心柱上進行,這對離心柱式核酸提取來說是一種節省時間的好方法,但對富含DNA的樣品而言就不那么有效率了(比如脾臟,胸腺,甚至某些土壤樣品),這種情況下,需要在溶液中對DNA進行酶解。

          經典的DNA酶解程序最后一步涉及加EDTA或者加熱滅活酶,這兩種方式都會影響RT-PCR結果:EDTA會抑制RT-PCR酶的活性,加熱會導致RNA完整性受損。另外,大部分DNA酶需要冷凍保存并且多管分裝以避免多次凍融降低酶活性。

          我們推出了一套能全程保護RNA的酶解體系:DNase Max

          DNase Max:是一種可在室溫下穩定保存的高活性(1ul酶能在20分鐘內消化30ugDNA)DNA酶溶液。最強大的部分是清除DNA酶這一步。DNA酶和陽離子被一種強特異性的樹脂吸附而從RNA樣品中清除,無需添加酶抑制劑或者加熱,終產物可直接用于qRT-PCR。與競爭性試劑盒比較,該樹脂非常高效,單次反應能完全去除10個單位DNA酶(如下圖,3-4泳道),而競爭試劑盒僅能去除2單位DNA酶(如下圖,1-2泳道)。

          這意味著幾個小時的工作過程中你都能很好的保護你的珍貴RNA,最終得到更準確的基因表達分析結果。

          DNase Max去除樹脂完全去除DNA酶

          RNA樣品分別由DNase Max™ 試劑盒和競爭對手的試劑盒進行DNA消化以及DNase去除。操作嚴格按照官方說明書進行。通過MO BIO 的DNase-free認證辦法,對DNase殘留活性進行分析。條帶5為陰性對照,不使用DNase。所有樣品37℃孵育1h,65℃ 5min滅活。1%瓊脂凝膠電泳展示如圖,DNase Max去除樹脂成功地去除掉所有DNase(條帶3-4),而競爭對手產品的樹脂并不能完全去除樣品中的所有DNase(條帶1-2)。

          保護RNA的其他產品

          無論什么來源的樣品,RNA的提取從來都是不容易的,尤其是樣品有限或者不可替代的時候。因為RNA不穩定,所以操作小心快速很關鍵。有很多方法可以在操作中保護起到RNA的作用,使你操作起來更加輕松而不必焦慮。

          用BME、均勻快速地研磨和使用帶清除樹脂并且經認證不含RNA酶的DNA酶將成為你成功提取任意樣品RNA的小技巧。此外,要去除工作臺和設備上的核酸酶,應用實驗室清潔噴霧(12095)十分有效,經認證不含RNA酶的手套(1556)的使用也能提供極大的幫助,在我們的實驗室,這些都是必不可少的。

          更多

          上一篇:定量評估抑制因子去除技術對粗提DNA及環境樣品腐植酸的去除效果
          下一篇:敬請期待

          關于我們 | 企業郵箱 | 管理登陸
          版權所有. 2014 深圳市安必勝科技有限公司. 最佳分辨率1440×900
          Copyright © 2007-2014 Anbiosci.com, All right reserved. 粵ICP備13063935
          13一14周岁无码a片